自身抗体检测是诊断的一个基石罕见的自身免疫性疾病系统性硬化症(SSc)。SSc的特点是异质群体的自身抗体针对不同抗原目标。一些抗体频繁发生,而另一些则很少见。大部分来自SSc病人血清显示一个孤立的反应只有一个抗原。因此,综合multiparametric分析不同的自身抗体是至关重要的减少诊断差距和增加SSc的血清学检测率。不同的自身抗体与不同的器官表现,自身抗体检测预后也有帮助。
系统性硬化病
SSc,也称为硬皮病,是一种自身免疫性结缔组织疾病主要发生在成年。大约2至50 100000人罹患SSc的全世界。早期症状的SSc缩短舌系带和雷诺氏综合症,紧随其后的是手和脚的水肿。皮肤变得僵硬,阿托、蜡质和薄。手中变形(爪手)高度锥形手指末端(麦当娜的手指),脸变得僵化和面具一样。在以后的阶段,无情的内部器官,特别是消化道、肺、心脏和肾脏发生。
SSc分为不同的子集。在有限的皮肤SSc,皮肤末梢的参与是有限的。弥漫性皮肤SSc,症状是广泛地分布在躯干、四肢近端和脸。第三个子集没有皮肤也参与。所谓的SSc CREST综合征表现与钙质沉着,雷诺氏综合症,食管功能障碍,指硬皮病(薄,苍白,增厚和无毛皮肤手指)和teleangiectasis(持久病理表面皮肤血管的扩张)。
SSc的诊断是根据标准建立的美国风湿病学院(ACR)和欧洲联盟对风湿病(欧拉描述)。然而,临床诊断是困难的,特别是在早期阶段,患者疾病的有限形式。目前已知的特定的自身抗体可以在患者SSc的95%以上。自身抗体诊断SSc促进早期诊断及其分化从其他collagenoses如系统性红斑狼疮、多发性肌炎、尖锐综合症和干燥综合征。自身抗体的特异性还提供的SSc亚型和作为疾病监测和预后的工具。
SSc的自身抗体
自身抗体在SSc导演主要针对细胞核的组件。目标抗原包括DNA拓扑异构酶1 (scl - 70),着丝粒蛋白(CENP A和B), RNA聚合酶III (Rp 11和RP155), PM-Scl复杂的蛋白质(PM-Scl100和PM-Scl75), fibrillarin,以及罕见的目标抗原(核仁组织区)90,Th /库。
不同的自身抗体特异性与不同类型的SSc相关联。抗体sci - 70, RP155 RP11分散形式的特征,而抗体CENP, CENP B和Th /有限的形式出现。抗体库,PM-Scl75 PM-Scl100表明重叠综合征。
预测疾病的课程
自身抗体测定可用于预测疾病的结果和器官参与。在最近的一项研究中,五大集群自身抗体与特定患者的临床和血清学协会定义SSc,即着丝粒,RNA聚合酶III强、弱RNA聚合酶,sci - 70,和其他自身抗体。anti-RNA聚合酶III的分离成两个集群基于反应的强度是一个新的方面,可能反映了不同时间阶段的SSc疾病。在进一步的研究中,发现了重大关联anti-Scl70与间质性肺疾病,anti-RNA聚合酶III和肾危机,anti-Th /和肺动脉高压,anti-U1 RNP和肺动脉高血压。自身抗体对Scl70 RNA聚合酶III和U1 RNP,此外,与相比显著降低生存anti-centromere抗体。因此,sub-classification和疾病分层使用自身抗体可能有临床实用程序,特别是在早期的疾病。
此外,频繁的共处各种风湿性疾病相关抗体,包括CENP, CENP B和sci - 70,用抗体特征对原发性胆汁性肝硬化已经观察到,强调的重要性考虑这两种疾病在血清学诊断。
自身抗体检测策略
SSc的自身抗体筛选通过间接免疫荧光试验(IIFT) HEp-2细胞和灵长类动物肝脏和证实了单一的测试。在IIFT SSc-associated自身抗体产生各种荧光模式,例如核仁的(如。反- sci - 70, anti-PM-Scl100、anti-PM-Scl75 anti-RP11, anti-RP155, anti-Th /, anti-NOR90, anti-fibrillarin),着丝粒(anti-CENP和anti-CENP B)或斑点(如anti-Ku)。一些典型的模式如图1所示。
多路复用免疫印迹非常适合确认抗体特异性,不同抗原可以包含在测试条和并行分析。特别是,行墨迹配备单独的膜芯片使得性质广泛不同的抗原结合在一个测试地带。SSc专用免疫印迹,EUROLINE系统性硬化症(核仁)概要文件(图2),允许确认12 SSc-associated同时自身抗体。特别是,它允许分化IIFT抗体显示核仁的模式。概要文件中包含的抗原是sci - 70, CENP, CENP B, RNA聚合酶III子单元RP11 RP155, fibrillarin,也- 90 Th /, PM-Scl100, PM-Scl75, Ku和PDGFR(血小板衍生生长因子受体)。Ro-52还包括提供更多的诊断信息,尽管Ro-52抗体不特定SSc。
临床发病率数据
在发表的临床研究中,129名患者的血清与临床特征SSc(扩散和有限的形式),142年疾病控制(肌炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎)和60健康献血者进行调查与EUROLINE概要文件(表1),在85%的SSc血清抗体的至少一个12相关SSc抗原检测。数据大相径庭的范围从反sci - 70 65% 1% anti-PDGFR非常罕见的参数。个人特异性抗原是至少98%。发表的进一步研究用大板的SSc患者和对照组,整体自身抗体SSc病人使用免疫印迹积极性率达到76%至89%,不同肥胖盛行程度对个人自身抗体根据队列。所有参数的特异性很高(93%到100%)。
IIFT结果的确认
129 SSc血清和142的面板控制上述血清也调查了IIFT HEp-2细胞。99%的SSc血清显示一个IIFT积极反应,核仁的显示模式(97血清),着丝粒(12血清),核仁的/重叠着丝粒(2血清)或他人(17血清)。EUROLINE证实100%的血清与着丝粒模式和93%的血清与核仁的模式,达到全面确认率为94%的SSc单一的模式。控制的只有17显示,IIFT核仁的模式,只有三个展示典型SSc抗体。这三个阳性血清起源于肌炎患者,这可能表明这些个体的重叠综合征。
全自动免疫印迹处理
这里描述系统性硬化病的免疫印迹可以手动或完全自动进行处理,例如,使用EUROBlotOne(图3)。这个设备提供完整的自动化的步骤,从样本数据条目发布报告。每运行到44条可以孵化,并可以结合系统性硬化症概要文件与其他免疫印迹概要文件在一个单一的运行。Preanalytical错误,避免由于错误定位的样品,由于集成条形码扫描器。此外,该设备自动集成的带相机拍照,和评价、解释和档案的用户友好EUROLineScan软件。
视角
识别小说SSc-specific自身抗体已经极大地增强了SSc的血清学诊断。与主要标记anti-Scl70 anti-centromere anti-RNA聚合酶III,现在许多罕见的自身抗体有助于诊断。此外,有越来越多的证据表明,SSc抗体可作为疾病的预测结果和器官参与。免疫印迹等EUROLINE multiparametric的理想方法,单一的特异性抗体测定。他们快速、容易理解,完全自动化,可以用在任何常规诊断实验室。随着进一步的小说自身抗体识别,免疫印迹可以很容易地补充了额外的参数。SSc免疫印迹概要文件也用于研究在SSc综合自身抗体检测的临床效用。预计持续的研究将有助于阐明特定抗体和特定疾病之间的关联课程和结果,并增加的理解这种具有挑战性的疾病的致病性。
图1:IIFT模式A)反sci - 70 B) anti-centromere anti-PM-Scl和C)
图2:EUROLINE系统性硬化症(核仁)概要文件
图3。EUROBlotOne免疫印迹的完全自动化处理
表1。自身抗体在系统性硬化症
* *的自身抗体 |
灵敏度 |
特异性 |
sci - 70 |
65% |
99% |
CENP一 |
11% |
99% |
CENP B |
13% |
99% |
RP11 |
5% |
100% |
RP155 |
7% |
100% |
Fibrillarin |
2% |
100% |
NOR90 |
4% |
99% |
Th / |
6% |
98% |
PM-Scl100 |
7% |
99% |
PM-Scl75 |
12% |
98% |
Ku |
6% |
99% |
PDGFR |
1% |
100% |
* *分析129年SSc患者血清和202年控制血清
