血清学测试现在的骨干腹腔病(CD)诊断、活检越来越沦为一个确认的作用和只用于澄清困难的情况下。官方诊断标准主要基于CD-specific抗体的检测,特别是对肌内膜(EmA)或组织转谷氨酰胺酶(tTG)和deamidated麦胶蛋白肽(文章)。分析免疫球蛋白类的免疫球蛋白g除了IgA可以安全诊断甚至在人缺IgA,发生的频率高于平均水平的CD。抗体测试监控无谷蛋白饮食也是有效的。CD-associated等位基因的遗传分析可以帮助排除诊断,尤其是在CD患者的近亲和人与相关疾病。
腹腔疾病
CD是一个系统性自身免疫性疾病有明显遗传倾向可能影响不同的器官。腹腔疾病的患病率是欧洲估计在1%左右,虽然非典型或轻微的症状被怀疑导致大量的剩余的未确诊的病例。在中东和北非地区(MENA), CD似乎像在欧洲一样普遍,报告数据大相径庭的低风险人群的0.1%到1.2%。光盘是由消费谷蛋白,占大约90%的许多粮食种子的蛋白质含量。该病主要表现严重的炎症和损伤小肠粘膜(肠下垂)。然而,由于养分吸收的影响,广泛的胃肠道和non-gastrointestinal症状可以开发,包括慢性腹泻、呕吐、腹痛、抽筋,生长障碍、体重减轻、延迟青春期,流产、贫血和骨质疏松症。临床表现的CD还包括慢性皮肤病疱疹样皮炎(Duhring病)。
发病机理
光盘是由遗传和环境因素的结合。典型的肠病是由免疫系统的过度反应引起的蛋白成分,尤其是醇溶蛋白。醇溶蛋白只是部分小肠消化,在CD患者残留醇溶蛋白片段能够通过肠道屏障进入底层的结缔组织。在这里,酶tTG修改(deamidates)的醇溶蛋白肽在特定位置将氨基酸谷氨酸盐转化为谷氨酸。修改后的肽触发免疫反应特别是人的基因变异DQ2和DQ8人类白细胞抗原(HLA)系统,导致生产抗体突变和人体自身的tTG和促炎细胞因子的分泌。结果小肠上皮细胞的炎症会导致肠道绒毛萎缩和肠隐窝的扩大(增生)。
ESPGHAN诊断标准
当前CD诊断指南的欧洲社会儿科Gastroentereology,肝脏病学和营养(ESPGHAN)中心的决心CD-specific抗体和遗传危险因素。CD的诊断指南定义两个策略:一个病人出现症状的CD和一个无症状的风险很高的个人CD。使诊断精度高的标准,旨在减少压力的病人如活检。如果anti-tTG IgA抗体的效价超过正常上限的10倍(> 10 x ULN)和进一步的非侵入性的验证性测试(例如EmA, hla dq2 / DQ8)执行,肠活检可以省略。患者的活检是现在只有必要的不确定的结果。
CD-specific抗体
自身抗体对tTG是一个非常敏感的和特定的标记CD。它们可以由单一的分析,如antigen-coated ELISA和免疫印迹或间接免疫荧光试验(IIFT)基于转染细胞表达重组tTG。它们也可以被IIFT使用组织的部分肝脏或食管。在这种方法中,他们被归类为EmA, tTG是实际的目标抗原的抗体。
deamidated抗体抗原表位的醇溶蛋白片段(anti-DGP抗体或抗体片段anti-gliadin CD-AGFA)特定的CD。本机醇溶蛋白的抗体,另一方面,更具体,不再是决定他们也经常发现在健康的个体。Anti-DGP抗体可以由ELISA、免疫印迹或单一的IIFT,例如基于专门设计的醇溶蛋白融合肽GAF-3X类似。
Anti-tTG和EmA免疫球蛋白类(IgA)尤其决定性诊断。然而,如果一个病人有一个选择性IgA不足(sIgAD),一个条件在CD患者发生的频率高于平均水平,anti-DGP类免疫球蛋白G(免疫球蛋白)是一个重要的替代指标的CD。
一般来说,CD-specific抗体的决心应该执行正常含谷蛋白饮食,因为他们消失在无谷蛋白饮食。
单独或复合抗体检测
不同的抗体检测方法可用于不同的实验室需求。elisa非常适合高通量的定量分析大样本数据,提供高度可靠的诊断结果。例如,活检确诊患者CD或疱疹样皮炎(n = 277)和对照组(n = 1126), Anti-tTG IgA ELISA产生了很高的敏感性96%,特异性98%。Anti-Gliadin (GAF-3X) ELISA产生免疫球蛋白的敏感性为95%和87%的IgA IgA免疫球蛋白的特异性为94%和93%。
IIFT提供非常具体的检测教育津贴。肝基质和食管也同样适合这个应用程序。例如,在CD患者(n = 298)和控制(n = 574)肝脏基质产生的敏感性为96%,特异性为97% EmA IgA,而对于食管,敏感性为95%,特异性为98%。肝脏提供额外的优势,它允许直接歧视的EmA anti-smooth肌肉抗体(ASMA),这在普通人群中出现的比较频繁。的EUROPLUS IIFT结合的组织切片检测EmA与GAF-3X抗原点平行检测anti-DGP荧光抗体(图1)。自动评价结果与EUROPattern软件增加IIFT分析的效率。
线污点EUROLINE包含涂膜芯片tTG和GAF-3X平行检测相应的抗体(图2)。此外,IgA控制带允许同时IgA缺陷的识别。自动化评估的污点EUROLineScan软件使定量测定表明浓度> 10 ULN。免疫印迹显示高特异性和敏感性对相应的elisa。
安全诊断不活组织检查
最近发表的研究已经证实了抗体测试的有效性没有活检诊断的CD。707年国际多中心研究儿科患者,标准的价值anti-tTG IgA > 10 x ULN确认,导致超过50%的活检被避免。值得注意的是,在比较研究anti-tTG ELISA来自不同制造商的最高数量> 10 x ULN导致面板的活检证实样品得到EUROIMMUN ELISA(范围:47% - 90%不同的化验)。
在1071年进一步测试样本,Anti-tTG ELISA (IgA)导致了一个明确的诊断。额外使用Anti-Gliadin anti-DGP抗体测定(GAF-3X) ELISA(免疫球蛋白)进一步增加了统计的准确性,这样的测试人员需要活检可以减少到11%以下。
在第一国际前瞻性研究898例患者,可以避免大量的活检结合测试使用Anti-tTG ELISA (IgA)和Anti-Gliadin (GAF-3X) ELISA(免疫球蛋白)。这个测试组合产生的阳性预测值99%,阴性预测值为96%,优于基于测试的方法总IgA anti-tTG IgA在一起。
可靠的血清学IgA缺乏症患者
患者sIgAD, anti-DGP抗体的检测类免疫球蛋白是一种有用的替代IgA-specific测试。面板的34 sIgAD患者的敏感性Anti-Gliadin (GAF-3X)的ELISA(免疫球蛋白)超过EmA IIFT(免疫球蛋白)和Anti-tTG ELISA(免疫球蛋白)。
无谷蛋白饮食的有效监控
无谷蛋白饮食(GFD)对CD患者的健康至关重要。GFD可以轻松监控使用Anti-Gliadin (GAF-3X) ELISA和Anti-tTG ELISA。饮食依从性导致减少抗体浓度(IgA免疫球蛋白)。在18个月的研究中,大多数的78测试病人坚持GFD明显下降CD-associated IgA免疫球蛋白和抗体。此外,在比较研究的测试来自不同制造商的Anti-tTG ELISA (IgA) EUROIMMUN反应最敏感增加浓度,如果饮食规则没有观察到。
HLA变体
腹腔疾病的决心HLA变体DQ2和DQ8建议尤其是不清楚诊断患者症状和无症状的风险的病人,例如CD患者的一级亲属和其他自身免疫性疾病,患者sIgAD或遗传综合征。如果存在hla dq2和dq8、CD可以一样好排除(阴性预测价值:至少98%)。
的hla dq分子形成一个α和β亚基组成。α和β亚基的基因编码在许多不同的形式存在于人类的人口。HLA-DQ2.2等位基因组合编码,-DQ2.5和dq8被认为是CD的危险因素。
所有临床重要相关基因的等位基因(HLA-DQA1和-DQB1)可以确定使用微阵列系统如EUROArray(图3)。这个测试系统,此外,区分人类和杂合的等位基因编码的α和β亚基HLA-DQ2.2 HLA-DQ2.5,允许提高风险评估。基因分析可以进行全血样品或隔离病人的基因组DNA,包括全自动数据评估。
视角
增加使用CD non-biopsy诊断临床实践的策略已确认其诊断精度高。特别是anti-tTG IgA的组合和anti-DGP免疫球蛋白g提供了最可靠的诊断/排除CD。执行测试都可以加强与灰色地带的病例诊断滴度为一个或其他的参数。基于一个外推模型从儿科CD和non-CD病人的一项研究,发现这个测试组合的预测值将保持95%以上甚至在临床发病率低至4%。因此,这种策略是最优的即使是低流行率患者群体。测试组合,此外,适合所有年龄段的人来说,随着抗体数据大相径庭的是类似于成人和儿童。可能获得一个CD没有侵入性诊断,昂贵和耗时的活检在儿科病人尤其有益。
