许多成年人有基因缺陷引起的乳糖酶基因(LCT)导致肠道疾病牛奶或奶制品的消费。分子诊断测试是主要用于证实或排除投诉消化的乳糖不耐症的原因。两个主要的多态性与乳糖不耐受,LCT - 13910 c / T和LCT - 13910 g / A,可以确定并行使用pcr微阵列分析。整个血液样本的使用简化了分析绕过DNA隔离的必要性。完全自动化的数据确保标准化和客观的评价结果。
原发性乳糖不耐症
原发性乳糖不耐受乳糖酶的基因缺陷引起,消化酶负责二糖乳糖分解成糖单体葡萄糖和半乳糖。不可分割的乳糖发酵在回肠和大肠,导致不必要的副产品,如短链脂肪酸,甲烷和氢气。这些导致消化紊乱和乳糖不耐症的典型症状,如腹痛、恶心、鼓胀和腹泻。次要症状包括缺陷,例如维生素,因此未指明的疲劳等症状,慢性疲劳和抑郁。
乳糖不耐症是哺乳动物的自然状态。断奶后乳糖酶活性降低,在成年后通常只有一小部分活动阶段。然而,一些人类保留代谢乳糖的能力到成年由于特定的基因变异。
乳糖耐受性多态性
总的来说,大约35%的全球人口持续乳糖酶。然而,不同人群之间的频率变化极大。乳糖耐受性流行地区有着悠久的传统畜牧业和乳品业。这是特别常见的在欧洲和欧洲血统的人群。
更高频率的西北大陆,发现减少cline朝东南。乳糖耐受性在这些人群,主要是与多态性LCT - 13910 c / T和LCT - 13910 g / A,它位于监管区域的乳糖酶基因。LCT - 13910 c / T和LCT - 22018 g / A等位基因在乳糖酶还发现持续的人口在印度次大陆。在牧区人口在非洲和阿拉伯半岛的东部,乳糖耐受性与其他各种多态性有关,如LCT - 13915 t / G, LCT - 14010 G / C, LCT - 13907 C / G。在亚洲东部的大部分地区,几乎100%的人口是乳糖不耐症。
根据目前的知识,纯合子的野生型变异携带者的LCT - 13910 C / C和LCT - 13910 G / G发展乳糖不耐受,而杂合的运营商的多态性LCT - 13910 C / T和LCT - 13910 G / A只显示相应的症状在压力的情况下或肠道感染。纯合突变体变异携带者的LCT - 13910 T / T和LCT - 13910 A /乳糖宽容作为成年人。这两个多态性是强烈耦合。
主要和次要乳糖不耐受
以及基因引起的主要形式,乳糖不耐症也会发生二次,收购的形式。这个发展由于肠道损伤,例如,从其他胃肠疾病,通常可以在几个月内解决。腹腔疾病、克罗恩病、感染性肠炎和伤害从腹部手术的条件,可能导致乳糖消化不良。
需要杰出的诊断继发性乳糖不耐受的主要形式由于不同的治疗方法。原发性乳糖不耐症患者必须坚持脱脂或low-lactose饮食生活,或者把乳糖酶补充剂。此外,这些患者需要确保适当摄入钙从其他来源预防继发性骨疾病由于milk-restricted饮食。继发性乳糖不耐症患者只需要限制乳制品的摄入量,直到肠道上皮细胞再生治疗的根本原因。
分子遗传诊断
分子基因测试可以验证或排除原发性乳糖不耐受高概率。它代表了一个重要的补充氢呼气试验和血糖测试。这些经典的测试通常有一个低特异性和敏感性和受到个人因素的影响,如肠道菌群的组成、结肠pH值,胃肠蠕动,对乳糖发酵产品。此外,经典测试不能区分主要和次要乳糖不耐受。相比之下,分子诊断测试使分化的两种形式。此外,基因检测是一种非侵入性、更舒适的检查,不携带引起乳糖不耐受的症状的风险非持久性的个人。
简单的微阵列分析
这两个多态性LCT - 13910 c / T和LCT - 13910 g / A可以同时确定使用分子基因检测等EUROArray乳糖不耐受直接。这个测试是进行全血样品,不再需要昂贵和耗时的DNA分离。在测试过程(图1),包含等位基因的DNA片段是由多路放大聚合酶链反应(PCR)使用高度特定的引物。在这个过程中PCR产品用荧光染料标记。PCR混合物然后孵化与微阵列幻灯片包含固定DNA探针。
PCR产物杂交探针互补和随后发现通过发射的荧光信号。数据评估完全自动使用EUROArrayScan软件(图2),在积极成果的情况下,纯合子和杂合的国家是有区别的。许多集成控制确保高可靠性的结果,例如,通过验证,没有其他罕见突变直接接近测试位置,这可能会干扰分析。所有EUROArray过程从样品到达报告释放试管验证和CE注册。
研究献血者
的性能EUROArray使用样本调查献血者来自德国北部。85年pre-characterised样本,EUROArray显示的敏感性为100%,特异性100%对分子遗传学方法的引用。
152年一群随机选择献血者样本,微阵列分析显示等位基因数据大相径庭的预期研究群体。LCT的等位基因- 13910 C / T,这些达20.4% C / C(纯合子C), 48.0% C / T(杂合的)和31.6% T / T(纯合子T)等位基因的LCT - 22018 G / G / G的肥胖盛行程度分别为19.7%(纯合子G), 40.0%为G / /(杂合的)和32.2%(纯合子)。大约20%的测试受试者因此乳糖不耐症。
牛奶过敏
投诉消化牛奶或奶制品的摄入也可能引起的过敏反应特定蛋白质的牛奶。这也应考虑的鉴别诊断。牛奶过敏与胃肠道功能紊乱是常见的儿童和体现,过敏性皮炎、荨麻疹、哮喘和过敏反应。牛奶过敏的诊断支持特定IgE抗体的检测牛奶蛋白质如酪蛋白、乳铁蛋白、α-和β-lactoglobulin和血清白蛋白。多路复用分析基于定义的部分过敏原(DPA-Dx)是特别适合建立一个详细的耐心的敏化作用。特别是,反应的微分heat-stabile和heat-labile组件有助于建立,奶制品可以容忍的病人(如奶酪、酸奶),必须严格避免。
视角
简单的分子遗传测试来检测的出现主要的多态性与原发性乳糖不耐受大大增强这种常见的诊断条件。基因检测是特别有用的区分主要二级乳糖不耐受,使病人更有针对性的管理。排斥的主要形式有助于直接注意寻找胃肠不适的另一个原因,可能挽救患者不必要地限制他们的饮食和潜在的长期钙摄入量。DNA测试快速、简单和非常具体,从而为病人提供一个有价值的初始测试灵敏度乳制品。
简单的分子遗传测试来检测的出现主要的多态性与原发性乳糖不耐受大大增强这种常见的诊断条件。
